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課程名稱 |
病毒基因工程學特論
Special Topics in Viral Genetic Engineering |
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開課學期 |
103-2 |
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授課對象 |
生命科學院 基因體與系統生物學學位學程 |
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授課教師 |
趙裕展 |
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課號 |
PPM5052 |
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課程識別碼 |
633 U1220 |
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班次 |
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學分 |
2 |
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全/半年 |
半年 |
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必/選修 |
選修 |
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上課時間 |
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上課地點 |
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備註 |
實驗操作為主
週六10:00-12:00在一號館321室
總人數上限：8人 |
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課程簡介影片 |
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核心能力關聯 |
核心能力與課程規劃關聯圖 |
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課程大綱
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為確保您我的權利,請尊重智慧財產權及不得非法影印
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課程概述 |
本課程包括桿狀病毒基因工程課程上課及討論課2-3堂，其他主要為實驗課。本課程的主旨讓同學親手從事實驗，練習如何用昆蟲桿狀病毒生產基因工程蛋白。昆蟲桿狀病毒對人無害，為目前所知大概是最好的蛋白基因工程工具，可以生產品質極佳的動物及人類蛋白，很有應用及產業價值。此病毒也可為組織工程及哺乳類細胞的基因轉殖工具，幫同學從事研究所的學術研究。是一個很有價值，對同學們未來的發展很有助益的課程。 |
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課程目標 |
本課程開授之主要目的在教導如何以基因工程的方法操控有用病毒，以生產對人類有益的產品。內容包括講授病毒基因工程的原理與方法，讓同學們能在知識面了解如何操控病毒。本課程更重視實務操作與經驗，提供充分的材料，並全程輔以助理協助，使同學們能掌握整個學習過程以及實際操作進度，而有實際的收穫。本課程將以植物保護之重要病毒，昆蟲桿狀病毒，為主要內容及材料，進行教學及實驗操作。基因工程操控桿狀病毒可以生產大量且高品質的蛋白質，而為醫、農、工業使用，如製造疫苗、飼料添加物、實驗室蛋白等等，對同學之知識面及將來研究或就業之實務面幫忙甚大。 |
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課程要求 |
2 學分 大學及研究所同學選修課程 |
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預期每週課後學習時數 |
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Office Hours |
另約時間 |
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指定閱讀 |
趙裕展, 2015, 病毒基因工程手冊 |
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參考書目 |
趙裕展, 2015, 病毒基因工程手冊 |
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評量方式
(僅供參考) |
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No. |
項目 |
百分比 |
說明 |
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1. |
出缺席狀況 |
20% |
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2. |
每項實驗結果 |
40% |
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3. |
實驗結果報告 |
40% |
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週次 |
日期 |
單元主題 |
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第1週 |
2/28 |
國定假日 |
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第2週 |
3/07 |
桿狀病毒基因工程方法及應用 |
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第3週 |
3/14 |
- 質體DNA限制酶切割、DNA片段電泳及回收
- 試測DNA回收量、結合反應（Ligation）
- 轉型作用(transformation) |
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第4週 |
3/21 |
- 利用 Colony PCR 進行確認
- 質體DNA的純化、貼細胞、共轉染作用(Co-Transfection)
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第5週 |
3/28 |
- 觀察重組病毒的螢光，並以上週共轉染作用(Co-Transfection)結果進行純化重組病毒
- 在96孔盤做細胞10倍稀釋
- 利用end-point dilution cloning 純化重組病毒
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第6週 |
4/04 |
國定假日 |
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第7週 |
4/11 |
- 觀察並標記出因病毒感染而發螢光的細胞位置
- 挑出純化之重組病毒於T25 flask中放大
- 上課
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第8週 |
4/18 |
- 不成功者重複實驗補結果 |
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第9週 |
4/25 |
期中考 |
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第10週 |
5/02 |
- 10倍稀釋病毒以測定桿狀病毒的力價(0ne of the 24-wells)
- 測定桿狀病毒的力價 (Q-PCR, 0ne of the 24-well)
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第11週 |
5/09 |
- 使用螢光顯微鏡觀察並記錄結果(TCID50)
- 比較TCID50 和Q-PCR之差異
- 感染細胞，生產fusing protein,準備下星期做western analysis分析產量
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第12週 |
5/16 |
- 以SDS-PAGE分析產出的蛋白質 |
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第13週 |
5/23 |
- 不成功者重複實驗補結果 |
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第14週 |
5/30 |
- 整理繳交期末報告 |
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第15週 |
6/06 |
- 做成幻燈片期末報告討論 |
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第16週 |
6/13 |
畢業典禮 |
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